쥐콩뉴클레오티드(Daidzein) ELISA 검사 키트 설명서

BS-8567 쥐 대두 뉴클레오티드(Daidzein) ELISA 키트

제품 개요

이 시약함은 경쟁성 효소연면역흡착법(ELISA)을 적용해 쥐의 혈장, 혈청 또는 조직균장 등 생체샘플에 있는 대두신원(Daidzein) 함량을 정량적으로 검사하는 데 전용됐다.콩뉴클레오티드는 천연 이소플라본류 화합물로 항산화, 항염 및 면역 조절 등 생물 활성을 가지고 있으며, 콩과 식물에 널리 존재하며, 그 함량 검사는 약리학 연구와 영양 평가에 매우 중요하다.이 시약함은 항원-항체 특이성 결합 원리를 바탕으로 효소 신호 증폭을 통해 고감도 검사를 실현하여 실험실의 일반적인 분석에 적용된다.

시약함 구성

미리 포장된 마이크로 공판: 96공 (12개 × 8공), 판자는 분해할 수 있고, 포장은 콩신 특이성 항체가 있다.

표준품: 6개 농도 경도(0.13~61.02ng/mL), 동결건조분상, 임용전 표준품 희석액 복용.

효소 표시물: 매운 뿌리 과산화물 효소 (HRP) 표시의 경쟁 항원, 갈색 피광 보존.

발색 바탕: TMB 용액, 무색 투명 액체.

종지액: 2M 황산 용액, 종지 반응에 사용.

세척액: 20×농축완충액으로 이온제거수로 희석하여 사용해야 한다.

샘플 희석액: 샘플의 농도를 검사 범위까지 조절하는 데 사용됩니다.

봉판막: 2장, 마이크로보드 밀봉용.

설명서: 1부.

저장 조건

미개봉 시약함: 2–8°C 피광 보존, 유효기간 12개월.

개봉 후: 표준품, 효소 표기물 및 발색 바탕물은 분리 냉동 (-20 °C) 해야 하며, 반복적인 냉동 융해를 피해야 한다;미공판 건조 밀봉 보관.

농축 세척액 동결 금지, 결정 석출 방지.

샘플 처리

혈장/혈청 샘플: 채집 후 즉시 원심(3000rpm, 10분), 청액을 채취하여 -80°C에서 보존한다.용혈을 피하다.

조직 균장: 조직을 취하고 생리 소금물 (1: 9 w/v) 균장을 넣고 원심에서 맑은 액을 취한다.

주의사항: 견본에서 콩뉴클레오티드는 결합상태로 존재할수 있으므로 베타-포도당알데히드산효소의 수해를 사용하여 검사민감도를 높일것을 건의한다.샘플이 혼탁할 때는 원심(5000rpm, 10분) 또는 여과(0.22μm 막)가 필요하다.

실험 절차

1. 시약 준비

세척액: 이온제거수로 20×농축액을 1×(예: 10mL 농축액+190mL 물)로 희석한다.

표준품 경도: 표준품 희석액으로 동결건조 표준품을 다시 녹이고, 경도는 0.13, 0.39, 1.17, 3.51, 10.53, 61.02 ng/mL로 희석한다.

샘플 희석: 샘플 희석액으로 측정 대기 샘플을 검측 범위 내로 희석합니다 (예전 실험으로 희석 배수를 확정하는 것이 좋습니다).

2.샘플링 및 부화

구멍당 100 μL 표준품 또는 샘플을 추가합니다 (공백 구멍을 설정하고 샘플 희석액만 추가).

구멍마다 50 μL 효소 마커를 넣고 가볍게 흔들어 섞는다.

37°C에서 빛을 피해 60분간 부화한다.

3. 세탁

구멍 내 액체를 버리고 구멍당 350μL의 세척액을 넣고 30초 동안 가만히 두었다가 털어내고 5회 반복하여 말린다.

4. 발색과 끝

구멍당 100μL의 발색 바탕물을 넣고 37°C에서 빛을 피해 15분간 부화한다.

구멍마다 종지액 100μL를 넣고 가볍게 흔들어 섞는다.

5. 측정

즉시 효소표시기로 450nm 파장에서 흡광도(OD값)를 측정하고 파장 630nm를 참고한다.

결과 계산

표준 곡선 그리기: 표준 제품 농도 (ng/mL) 를 가로 좌표로, OD값 을 세로 좌표로 4매개변수 논리 곡선을 맞춥니다 (전문 소프트웨어 권장).

표본농도계산: 표본OD값에 근거하여 표준곡선방정식을 대입하고 희석배수를 곱하여 실제농도를 얻는다.

성능 매개 변수

민감도: 0.13ng/mL의 테스트 한계.

정밀도: 판내 변이 계수(CV)<10%, 판간 CV<15%.

회수율: 80 – 120% (검증 방법: 레이블 추가 회수 실험).

선형 범위: 0.13 – 61.02 ng/mL, 상관 계수 r² ≥ 0.98.

특이성: 염료 멜라닌과 같은 유사한 구조 화합물과 교차 반응률 <5%.

주의사항

조작 규범: 효소 표기물과 발색 바탕물이 금속 이온에 접촉하는 것을 피한다;발색 후 30분 이내에 측정하여 신호 감쇠를 방지한다.

품질 관리: 각 실험에는 표준 곡선과 품질 관리 샘플 (고, 중, 저 농도 권장) 이 포함되어야 합니다.

안전 보호: 종지액은 강산을 함유하고 있으며, 장갑과 고글을 착용하여 조작해야 한다.

폐기물 처리: 효소 함유 폐기물은 불활성화 처리 후 버려야 한다.

FAQ

신호가 낮음: 부화시간이나 온도가 부족한지 검사한다.세탁 절차가 충분한지 확인하세요.

높은 배경값: 세탁 또는 샘플 기질의 방해로 인해 세탁 횟수를 늘리거나 샘플 전 처리를 최적화하는 것이 좋습니다.

표준곡선이상: 표준품을 복용할 때 충분히 혼합하여 기포가 농도의 정확성에 영향을 주지 않도록 해야 한다.

주: 본 제품은 과학 연구에만 사용되며 실험 근거로 삼지 않습니다.구체적인 조작은 실제 시약함 설명서를 기준으로 하십시오.

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