인간 감마 인터페론(IFN-감마) ELISA 검사 키트 기술 설명서

BS-0033인용 감마 인터페론(IFN-감마) ELISA 키트

1. 검측원리

이 시약함은 이중항체 협심법 효소연면역흡착시험(ELISA)을 사용한다.항인 IFN-감마 단일 클론 항체를 마이크로 보드에 사전 패키지하여 샘플, 표준품 및 바이오매스 표기의 검사 항체를 순차적으로 추가하여 항체-항원-효소 표기 항체 복합체를 형성한다.세탁 후 매운 뿌리 과산화물 효소 표기된 스트렙타바이딘-HRP(Streptavidin-HRP)를 결합해 TMB 바탕을 통해 발색한다.색상 농도는 샘플에서 IFN-감마 농도와 상관관계가 있어 효소표시기를 이용해 흡광도(OD값)를 측정해 정량 분석한다.

2. 시약함 구성

그룹 96 구멍 구성 48 구멍 구성 저장 조건

미리 패키징된 마이크로 패널 12 구멍 × 8 개 12 구멍 × 4 개 2-8 ℃

동결건조 표준품 1관 1관 2-8 ℃ (재용해 후 -20 ℃)

바이오매스 마커 항체 100 μL 100 μL 2-8 ℃ (피광)

스트렙토마이신 - HRP 100 μL 100 μL 2-8 ℃ (피광)

샘플 희석액 30mL 15mL 2-8 ℃

20×세척 완충액 20mL 10mL 2-8℃

TMB 베이스액 10mL 5mL 2-8℃ 피광

종료액 10mL 5mL 2-8 ℃

봉판막 4장 2장 실온

3. 견본 요구

1. 샘플 유형

혈청/혈장: EDTA 또는 헤모글로빈을 사용하여 응고를 방지하고 용혈을 피합니다.

세포배양상청: 원심분리로 과립물을 제거하고 반복적으로 얼어붙지 않도록 해야 한다.

기타 생물체액: 례를 들면 뇌척수액, 흉복수는 맑힌후 검사해야 한다.

2. 샘플 처리

희석비율: 혈청/혈장은 1:5 희석 (샘플: 희석액 = 1:4), 세포상청은 1:2 희석을 권장한다.

보존조건": 단기 (≤7일) 2-8 ℃ 로 보존하고 장기적으로 분장하여 -80 ℃ 에 보관해야 한다 (반복적으로 얼지 않도록 해야 한다).

4. 실험절차

1. 시약 준비

세척액: 증류수로 20×농축액을 1×작업액(예: 20mL 농축액+380mL 물)으로 희석한다.

표준품 복용: 동결건조 표준품은 표준품 희석액 1mL를 첨가하여 15분간 정장하고 고농도 모액으로 배합한다.

경도 희석: 7개의 EP관을 취하여 각 관에 500μL의 희석액을 첨가하고 모액에서 500μL를 한 관으로 옮겨 혼합하여 순서대로 배율 희석한다 (예: 1000→500→250→125→62.5→31.25→15.625pg/mL).

2.샘플링과 온육

구멍당 100 μL 표준품 또는 희석 후 샘플을 추가합니다 (복수 구멍 검사 권장).

37 ℃ 피광온육 90분, 봉판막 밀봉.

3. 세탁

구멍 안의 액체를 털어내고 1 × 세제로 3회 세탁하고 매번 1분 동안 담가 말린다.

4. 발색과 끝

구멍당 100μL 바이오매스 표시 항체(미리 항체 희석액 1:100으로 희석)를 넣고 37℃ 피광온육 60분.

세탁 후 구멍당 스트렙토마이신-HRP 100μL(미리 ABC 희석액 1:100으로 희석)를 넣어 37℃ 피광온도로 30분간 키운다.

세탁 후 구멍당 100 μL TMB 베이스 리퀴드를 넣고 37 ℃ 피광 발색을 15-20 분 정도 한다.

구멍당 50 μL 종지액 종지반응(용액이 파란색에서 노란색으로 변함)을 첨가한다.

5. 측정

30분 동안 효소 측정기로 450nm 파장 OD값(파장 570-630nm 참조)을 측정한다.

5. 결과 계산

표준 농도는 가로, OD값은 누진으로 표준 커브를 그립니다 (4 매개변수 맞춤).

샘플 OD값에 근거하여 회귀 방정식을 통해 실제 농도를 계산하며, 샘플이 희석될 경우 희석 배수를 곱해야 한다.

6. 성능 지표

매개변수 지표

감도 ≤ 1.0 pg/mL

검사 범위 15.63 – 1000pg/mL

정밀도 패널 내 CV <10%

회수율 83% - 113%

특이성과 인간 IL-2, IL-4 등은 교차 반응이 없다

7. 주의사항

시약 보존: 판자를 사용하지 않으면 2-8 ℃ 에 밀봉하여 보존하여 습기가 차지 않도록 해야 한다;TMB 베이스 액체는 빛을 피해야 한다.

샘플 처리: 용혈, 고지혈지 샘플 사용을 피한다;고농도 샘플은 사전 실험을 통해 희석 배수를 확정해야 한다.

작업 사양:

샘플을 추가할 때 기포를 피하고 총머리를 교체해야 한다.

온육 시간을 규정된 범위 내에서 엄격히 통제하여 증발을 방지하다.

품질 제어: 매 실험마다 빈 구멍 (S0) 과 음성 대조를 설정해야 한다.

안전 힌트: 액체 함유 산 종료, 장갑을 끼고 조작해야 한다;폐기물은 생물학적 위해에 따라 처리한다.

8. 유효기간

시약함은 2-8 ℃ 에서 유효기간은 6개월이며, 개봉 후 표준품은 -20 ℃ 에 분리하여 보관할 것을 권장한다.

주: 이상은 참고용으로만 제공되며 본 제품은 과학연구에만 사용되며 실제수치로 삼지 않으며 실험은 설명을 엄격히 따르거나 기술선생님에게 자문해야 한다.

인터루킨1 (IL-1) ELISA 시약함 실험 사용설명서 서생은 줄곧 품질통제를 기업의 생명으로 간주하고 기업경쟁력의 끊임없는 향상을 추구해왔다.회사는 경영에서 시종일관 규율과 법을 준수하고, 자신을 엄하게 단속하며, 너그럽게 대하고, 과감하게 책임지는 기업 정신을 표준으로 삼으며, 견고한 품질과 우수한 서비스로 시장을 수호하고 확장하며, 고객의 수요를 비교적 큰 한도로 만족시킨다.고객과의 상생은 우리의 발전 목표이다.본생!신뢰할 수 있는 파트너우리는 당신과 진심으로 협력하여 아름다운 미래를 함께 창조하기를 원합니다.본생 시약함