미생물 리그닌(Lignin) ELISA 검사 키트 기술 설명서

BS-5184 미생물 리그닌(Lignin) ELISA 키트

1. 제품 개요

이 시약함은 이중항체협심효소연면역흡착법(ELISA)을 적용해 미생물 발효액, 세포분해액 등 샘플의 리그닌 함량을 정량적으로 측정하는 데 전용됐다.리그닌은 미생물이 식물의 세포벽을 대사하거나 분해하는 과정에서 발생하는 방향족 중합체로, 그 함량 변화는 미생물의 리그닌 섬유소 이용 효율을 반영한다.

2. 검측 원리

고상항체팩은 마이크로보드에 의해 샘플의 목질소를 포획하고 다시 효소표시검사항체를 첨가하여'항체-항원-효소표시항체'복합물을 형성한다.세탁 후 TMB 바탕물을 넣어 발색하고, 450nm 파장에서 흡광도를 측정하며, 흡광도 값은 목질소 농도와 상관관계가 있다.

3. 시약함 구성

그룹 96 구멍 구성 48 구멍 구성 저장 조건

미공 효소 표지판 12공 × 8개 12공 × 4개 2-8℃ 밀봉 건조

표준품(목질소) 0.5mL×6관 0.5mL×6관 -20℃ 피광

샘플 희석액 6mL 3mL 2-8 ℃

효소 표적 항체 - HRP 10mL 5mL 2-8 ℃ 피광

20×세척 완충액 25mL 15mL 실온

TMB 발색액 9mL 4.5mL 2-8℃ 피광

종료액 9mL 4.5mL 실온

봉판막 2장 2장 실온

4. 샘플 처리

4.1 미생물 발효액

8000×g 원심분리 10분 균체 제거

맑은 액체를 취하여 즉시 검사 또는 -80 ℃ 동결 보관 (반복적인 동결 방지)

4.2 세포분해액

초음파 파쇄 후 12000 × g 원심분리 15분

청액 채취해 PBS로 10배 희석한 뒤 검사

4.3 주의 사항

샘플 혼탁은 0.22μm 여과막 여과가 필요하다

질소 나트륨 함유 샘플 사용 피하기 (HRP 활성 억제)

5. 실험 단계

5.1 시약 준비

세척 완충액: 증류수 희석 20배 ~ 1× 작업액

표준품 경도: 설명서에 따라 0-60μg/mL로 희석

5.2 샘플링

표준품/샘플 각각 50μL씩 대응 마이크로홀 추가

37℃ 부화 30분

5.3 세탁

구멍당 300 μL 세제를 넣고 1분 정도 가만히 두었다가 말린다

5회 반복

5.4 발색

구멍당 효소표시 항체 100 μL, 37 ℃ 부화 30분

세탁 후 TMB 발색액 90μL를 첨가하여 15분간 빛을 피한다

종지액 50 μL 첨가 종지 반응

5.5 측정

450nm 파장 측정 OD값(파장 630nm 참조)

6. 결과 계산

표준 농도는 가로, OD값은 누진으로 표준 커브를 그립니다.샘플의 농도는 곡선 방정식을 통해 계산되며, 범위를 초과하면 희석한 후 재측정해야 한다.

7. 성능 지표

매개변수 지표

감도 ≤ 0.5μg/mL

검사 범위 1-60 μg/mL

정밀도 배치 내 CV<8%, 배치 간 CV<12%

회수율 85% - 115%

8. 주의사항

시약함 사용 전 실온 균형 30분 필요

서로 다른 로트 시약은 혼용할 수 없다

종료액 강산 함유, 조작시 보호장비 착용

발색액 은 금속 이온 에 닿지 않도록 한다

미량 이액기 는 교차 오염 을 피하기 위해 교정해야 한다

9. 유효기간

6개월 (2-8 ℃ 보존)

10. 성명

본 제품은 과학 연구에만 사용됩니다.

주: 이상은 참고용으로만 제공되며 본 시약은 과학연구에만 사용되며 실제수치로 삼지 않으며 실험은 설명을 엄격히 따르거나 기술선생님에게 자문해야 한다.

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