식물1,5-이인산케톤당 카르복실화효소(RuBisCO) ELISA 검사키트 기술설명서

BS-4938 식물 1,5- 디인산 케톤 카르복실화 효소 (RuBisCO) ELISA 키트 96T/48T

제품 개요

이 키트는 식물 조직, 세포 및 관련 액체 샘플에서 케톤 당 -1,5- 디인산 카르복실화 효소/산소 첨가 효소 (RuBisCO) 의 활성을 체외 정량 검사하는 데 사용됩니다.이 효소는 식물의 광합성 작용인 캘빈 순환의 핵심 효소로, 그 활성은 광합성 속도와 광호흡 과정에 직접적인 영향을 미친다.이 키트는 이중항체협심효소연면역흡착법(ELISA)으로 고감도와 특이성을 갖췄다.

검측 원리

시약함은 이중항체 1단계 협심법을 사용한다.

RuBisCO 단항에 저항하는 마이크로 보드에 의해 샘플에서 대상 효소를 캡처하는 사전 패키지

HRP 마커를 넣은 검사 항체는'항체-항원-효소 표시 항체'복합체를 형성한다

깨끗이 세탁한 후, TMB 발색 바탕을 넣다

반응이 종료된 후 효소 측정기는 450nm 파장에서 흡광도(OD값)를 측정한다

샘플에서 RuBisCO 농도는 OD값과 상관관계가 있음

시약함 구성

그룹 지정 저장 기준

미리 패키징된 마이크로 슬롯 12 × 8 구멍 4 ℃

표준품 (6개 농도 경도) 0.3mL × 6관 -20℃

효소 표적 항체 15mL 4℃

20×세척 완충액 50mL 실온

TMB 발색액 A/B 각 15mL 4℃ 피광

종료액 15mL 실온

샘플 희석액 30mL 4℃

샘플 처리

조직 샘플

0.1g의 조직을 달아 1mL의 추출액을 넣고 얼음욕 균장을 넣는다

10000g 4℃ 원심분리 10분

맑은 액체를 채취하여 즉시 검측 또는 -80 ℃ 보존 (반복적으로 얼지 않음)

세포 샘플

세포 침전 을 수집하여 추출액 을 첨가하여 분해 하다

10000g 4℃ 원심분리 10분

청액을 채취하여 검사하다.

혈청 / 액체 샘플

실온은 2시간 또는 4 ℃ 로 정치하여 밤을 지낸다

1000g 원심분리 20분

청액을 채취하여 검사하다.

주의 사항:

샘플 용혈 방지

NaN3는 HRP 활성을 억제합니다.

신선한 샘플을 우선시하고, 샘플을 얼려서 보관하면 반복적으로 얼지 않도록 한다

작업 단계

시약 준비: 모든 시약 사용 전 실온(20-25도)까지 균형

샘플링:

표준품공: 50μL 다른 농도 표준품

샘플 구멍: 50 μL 대기 샘플

빈 구멍: 넣지 않음

온육: 구멍당 100μL 효소표시항체 첨가, 37 ℃ 피광반응 60분

워싱: 구멍당 350 μL 워싱액을 넣고 1분 정도 가만히 두었다가 털어내고 5회 반복

발색: 구멍당 50 μL 베이스 A와 B를 첨가하고 37 ℃ 피광 반응 15분

종료: 구멍당 50μL 종료액 첨가

측정: 15분 동안 효소 측정기로 450nm OD값 측정

결과 계산

표준 농도를 가로로, OD값을 누진으로 표준 커브 그리기

샘플 OD값에 근거하여 표준 곡선에서 농도를 조사하다

샘플 농도 = 측정된 농도 × 희석 배수 (있을 경우)

성능 지표

검사 범위: 18-650 U/L

감도: ≤ 5 U/L

일괄 변이 계수: <10%

배치 변이 계수: <15%

주의사항

시약함 유효기간 6개월, 2-8 ℃ 보존

서로 다른 로트 시약은 혼용할 수 없다

발색액 피광 보존

세탁이 깨끗하지 않으면 가짜 양성을 초래할 수 있다

종지액 부식성 물질 함유, 조작 시 보호 필요

모든 폐기물은 생물 유해물에 따라 처리한다.

필요한 기구

효소 측정기(450nm 필터)

정밀 이액기(0.5-1000μL)

37 ℃ 항온상자

세판기 (옵션)

터빈 혼합기

주: 과학 연구에 사용하고, 이상의 자료는 참고로 제공하며, 실험 근거로 삼지 않으며, 구체적으로 기술 선생님이나 브랜드 상인에게 문의하십시오.

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