Elisa 실험: Elisa 커브 문제

ELISA 실험에서 곡선에 문제가 생긴 것은 대부분 표준품, 조작 또는 설비가 제대로 갖춰지지 않은 것이다.핵심 결론: 표곡 문제는 일반적으로 표준품 처리, 샘플링 조작 또는 부화 조건에서 발생하며, 이러한 부분을 중점적으로 검사하면 빠르게 위치를 정할 수 있다.

1. 표준곡선이 좋지 않은 흔히 볼수 있는 원인

표준품 용해와 희석이 부당하다

표준품 가루가 충분히 용해되지 않았거나 희석할 때 고르게 섞이지 않아 농도가 정확하지 않다.

건의: 설명서에 따라 지정된 희석액을 사용하고, 용해 후 잠시 원심을 분리하며, 경도 희석 시 새 총머리를 사용하고, 불거나 소용돌이를 섞어야 한다.

샘플링 작업이 정확하지 않음

이액기가 교정되지 않았거나 샘플링 속도, 각도가 일치하지 않아 구멍 간의 부피 차이가 크다.

건의: 정기적으로 이액기를 교정하고 샘플을 추가할 때 수직이고 평온하며 총머리는 액면에 붙이지만 바닥에 닿지 않아 기포를 피면한다.

부화 조건이 일정하지 않다.

판막이 없거나 뚜껑이 엄격하지 않아 가장자리 효과를 초래한다;온도 시간이 불안정하다.

건의: 고품질의 봉판막, 효소표판으로 항온부화기를 놓아 자연부화를 피면해야 한다.

2. 기타 흔히 볼수 있는 곡선문제 및 대책

전체적으로 낮다

가능한 원인: 시약이 만료되었고, 표준품이 용해되지 않았으며, 액체를 종료한 후 즉시 검사하지 않았고, 시약이 혼용되었다.

건의: 설명서에 따라 시약을 보존하고, 표준품은 용해하기 전에 원심을 분리하고, 희석액을 첨가한 후 조용히 혼합하고, 종료액 후 즉시 검사한다.

신호가 없다

가능한 원인: 시약 만료, HRP 효소 오염, 조작 실수 (예: 샘플링 순서가 틀린 경우).

건의: 시약 라벨을 검사하고 신선한 증류수에 완충액을 배합하여 시약실온의 균형을 30분 맞춘다.

전체적으로 높다

가능한 원인: 효소 측정기의 광밀도 범위가 너무 넓고, 작업액 농도가 높으며, 부화 시간이 길다/온도가 높다.

건의: 광밀도 범위는 0-3.5를 설정하고, 작업액은 현재 배합하여 사용하며, 부화 상자의 온도는 37±0.5 ℃ 를 제어한다.

3. 최적화 건의

표준품 처리: 용해 전 원심, 희석액을 첨가한 후 정치 혼합.

샘플링 조작: 이액기를 교정하고, 샘플링은 수직으로 평온하며, 기포를 피한다.

부화 조건: 봉판막으로 밀봉하고, 효소 표지판에 항온 부화기를 넣는다.

설비검사: 정기적으로 이액기를 교정하고 효소표시기는 정확한 광밀도범위를 설정한다.

주: 이상은 참고용으로만 제공되며 본 제품은 과학연구에만 사용되며 실제수치로 삼지 않으며 실험은 설명을 엄격히 따르거나 기술선생님에게 자문해야 한다.

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