액상 크로마토그래프의 기본 작업 원리는 샘플에서 각 그룹이 고정상과 유동상 사이의 분배 계수의 차이를 바탕으로 분리를 실현하는 것이다.혼합 시료가 액상 크로마토그래피 시스템에 주입되면 유동상 (예: 물, 메탄올, 아크릴 등 액상 용매) 에 따라 고정상 (예: 실리콘, 화학 결합상, 폴리머 등 다공성 입자 재료) 이 장착된 크로마토그래피 기둥으로 들어간다.서로 다른 조분과 고정상 사이의 상호작용력 (예를 들어 흡착, 분배, 저항, 친화 등) 에 차이가 존재하기 때문에 고정상에서의 체류시간도 각각 다르다.구체적으로 고정상과 상호작용이 약한 성분은 흐름에 따라 이동하는 속도가 빨라 크로마토그래피 기둥이 먼저 흘러나온다.고정과 밀접하게 결합된 그룹은 이동 속도가 느리고 나중에 크로마토그래피 기둥이 흘러나온다.이 과정을 통해 혼합물 중의 각 조분은 하나하나 분리될 수 있다.또한 분리 효과는 용질의 양상 간 분배 계수 차이(열역학적 요인)에 따라 달라질 뿐만 아니라 확산 계수, 고정 상립도, 기둥 충전 상황 및 유동 상류속 등 동력학적 요인의 영향을 받는다.

액상 크로마토그래프 사용 주의사항:

1. 흐름상 선택 및 처리

- HPLC급 또는 그 이상의 용제를 선택해야 하며, 물은 2차 증류수 또는 초순수를 사용해야 하며, 미생물 자생 오염 시스템을 방지하기 위해 현재 사용하고 있다.

- 유동 배합 후 온도 차이로 인한 성능 불안정을 방지하기 위해 실온으로 복원하여 사용해야 합니다.

- 완충염 용액을 사용할 때는 반드시 여과하고 사용 전후에 순수한 물로 유로를 세척하여 완충염 용액을 유로에 남겨 두는 것을 금지한다.이와 동시에 크로마토그래피기둥은 먼저 저비례유기상 (유기상함량이 5보다 낮지 않음) 으로 씻은 다음 고비례유기상으로 보존하여 완충염이 분출되지 않도록 해야 한다.가급적 고농도 인산 완충염(>10mmol/L) 사용을 피한다.

- 순수한 아크릴로니트릴을 유동상으로 사용하는 것을 최대한 피하여 아크릴로니트릴이 중합되어 액체가 흡수되지 않는 것을 방지한다.사용하지 않으면 안 될 때는 갈색 병으로 보관하는 것을 권장한다.

2. 작업 사양

- 고압 파이프라인 연결부 유압 상태에서 해체 금지.

- 유속을 조절할 때는 압력과 온도의 급격한 변화를 피하고 기둥 내 충전재를 충격하지 않도록 조심해야 한다.

- 검측 시료 용액의 용매 구성을 변경할 때는 점진적으로 진행해야 하며, 특히 반상 크로마토그래프에서는 유기용매를 직접 순수한 물로 대체하거나 그 반대로 대체해서는 안 된다.

- 자외선 검출기 전원이 꺼진 후 30분 정도 냉각한 후 꺼야 합니다.

3. 보안 유지 관리

- 폐액은 분류하여 수집해야 하며, 유기 폐액은 직접 배출해서는 안 된다.

- 샘플 바늘 세척, 밀폐 패드 교체 등 정기적으로 기기를 유지 관리한다.