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Cy3 NHS Ester, Cy3-N-히드록시 앰플아미드
날짜:2018-10-06읽기 :0

Cy3 NHS 에스테르Cy3-N-는히드록시 호박 아미드

제품 정보:

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규격

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가격 (원)

Cy3 NHS Ester Cy3-N-히드록시 앰플아미드

10mg

-20 ℃ 피광 건조 보존

2050.00

공급업체:서안개신생물과학기술유한공사

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제품 설명

Cyanine 3(Cy3),안토시아닌 형광소 염료 가문의 구성원 중 한 명으로 화학적으로 합성된 폴리메틸렌 염료다.현재 Cyanine 계열 염료는 비황화 안토시아닌 (non-sulfonated cyanines) 과 황화 안토시아닌 (sulfonatedcyanine) 의 두 가지 이구체 형태로 공급되고 있다.양자의 스펙트럼 성질은 거의 일치하기 때문에 대부분의 응용은 서로 교체할 수 있다. 예를 들어 DNA나 단백질 등 생물 분자를 표시하는 데 사용할 수 있다.양자의 주요 차이점은 술폰화 염료는 수용성이기 때문에 수상의 표기 반응 체계 내에서 유기 공용제를 사용할 필요가 없으며 염료가 물에 모일 가능성을 낮추고 표기 효율을 강화한다는 것이다.

본 Cyanine 3 (Cy3)은 유황화 염료로 공급되며 물에 잘 녹고,Ex=555 nm,Em=565nm,밝은형광, 광안정성이 강하고 pH비민감성 등 장점이 있으며 폴리펩티드, 단백질 및 핵산 등 생물분자를 표기하여 후속형광영상 및 기타 형광생물학방법을 통해 목적단백질을 분석하는데 적용된다.

본 Cy3 NHS ester, 즉 N-하이드록시 호박 아미드 (N-Hydroxysuccinimide) 활성 기단을 함유한 Cy3는 생화학 분자의 아미노 (NH) 와 직접2) 반응은 안정적인 아미드 결합을 형성하는데 주로 아미드이다.

제품성

영어 별칭 (영어 동의어)

시아닌 3의 monosuccinimidyl 에스테르

분자량 (분자량)

829.03

모양새 (외관)

자색 고체

Ex/Em은

555nm/565nm

용해성 (용해성)

DMSO, DMF, 물에 녹는다

구조식 (구조)

운송 및 보존 방법

아이스팩 수송.-20 ℃ 건조 피광 보존, 유효기간 1년.

주의사항

1) NHS ester 기단은 습도에 매우 민감하므로 반드시 제품을 건조하여 보관해야 한다.사용 전 제품은 실온에서 최소 20min 돌려야 한다.

2) NHS ester 기단의 수해가 수용성 완충 체계에서 발생하는 것은 경쟁적 반응에 속한다.단백질/폴리펩티드(농도: 1-1mg/ml) 아민에 대한 연결 반응은 pH 7-9 범위에서 하는 것이 좋습니다.암모니아가 함유되지 않은 완충 체계를 사용하여pH 7-9。예를 들어 100mM 인산나트륨, 150mM 염화나트륨, pH7.5; 100mM Hepes, pH 7.5。100 mM 탄산나트륨/탄산수소나트륨, pH 8-9;또는 100 mM 붕산 완충액, pH 8-9.

3) 트리스, 글리신과 같은 아민이 함유된 완충액을 사용하지 마십시오.

4) 당신의 안전과 건강을 위하여 실험복을 입고 일회용 장갑을 끼고 조작하십시오.

사용 방법 (사용Cy3-NHS 에스테르마커 항체)

【주의]: 이 방법을 참고하여 폴리펩타이드, 단백질 또는 기타 분자의 표기를 진행할 수 있으며, 구체적인 실험 체계에 따라 적합한 표기 완충 체계, 샘플 농도, 염료 농도 등 파라미터에 대해 적합한 조정을 해야 한다.

1) 아미노기가 함유되지 않은 적합한 완충액(eg.100mM 인산나트륨, 150mM NaCl, pH7.5)으로 항체를 용해하여 농도를 1-5mg/ml로 한다.【주]: 항체에 Tris 또는 glycine 오염이 남아 있는 경우 적절한 완충액에 투석 또는 탈염해야 합니다.

2) 사용 전 적당량의 이온제거 물이나 무수 DMSO로 Cy3-NHS를 용해하여 무어 농도를 항체 무어 농도의 400배로 한다. 예를 들어 표시할 IgG 농도가 1mg/ml(eg 6.7μM)이면 용해 후 Cy3-NHS의 농도는 2.7mM이다. 표시할 IgG 농도가 2.5mg/ml이면 용해 후 Cy3-NHS의 농도는 6.7mmmmmmmmmmmmmmmmml이다.

3) 항체에 적당량의 Cy3-NHS 시약을 첨가하여 예상한 표기 효율을 달성한다.【주]: Cy 3 NHS ester로 항체나 기타 단백질을 표시할 때, 밝기가 높은 우연물의 염료/단백질의 비율은 4-12이며, 특정 응용에 달려 있다.높은 비율은 비특이성 배경을 증가시켜 항체 특이성 결합을 상실해 집합을 초래한다.애플리케이션에 따라 태그 비율을 최적화하는 것이 좋습니다.

4) 실온부화 60min (또는 그 이상);

5) 적합한 완충액을 이용하여 투석 또는 탈염기둥으로 미반응 시약을 제거한다.

6) 각각 280nm와 550nm에서 Cy3-항체의 흡광값을 검사한다.

7) Cy3 표식 효율(DOL)과 표식 농도를 측정한다.공식을 보시오.