(1) 영양 수요

· 아미노산 -- 12가지 필수 아미노산 (발린, 글리신, 이소아미노산, 소아미노산, 라이신, 트립토판, 페닐알라닌, 알리신, 조아미노산, 타이로신, 아르기닌, 세미노산, 시스테론산);10가지 비필수 아미노산;이밖에 또 글루타민이 수요되는데 이는 세포대사과정에서 중요한 역할을 하는데 함유된 질소는 핵산중의 퓨린과 피리딘합성의 래원이며 마찬가지로 3, 2, 1 인산아미드를 합성하는데 필요한 기본물질이기도 하다.

· 탄수화물----당류--포도당;반유당;세포는 포도당에 대한 흡수력이 가장 높고 반유당은 낮다.

· 무기염---나트륨, 칼륨, 마그네슘, 인, 칼슘 등;

· 비타민---바이오매스, 엽산, 리보플라빈, 비타민C, 비타민B12, 피리독신 등;

· 단백질과 펩타이드---백단백질, 펩타이드 효소, 태구단백질, 섬유접착단백질, 트랜스퍼단백질, 성장인자;

· 지방산과 지방류 물질인 아유산, 유산, 콜레스테롤 등;

· 미량원소 - 철, 아연, 셀렌, 구리, 망간, 몰리브덴, 바나듐 등.

(2) 온도

흔히 사용하는 온도는 37 ° 이지만 서로 다른 생물원천의 조직세포에 주의를 돌려야 하며 가장 적합한 배양온도는 부동하며 세포는 저온에 견디고 고온에 견디지 못한다.생리 온도 범위 내에서 온도는 세포 성장률과 상관관계가 있다.

(3) 삼투압

삼투압의 크기는 주로 배지의 각종 소금 성분의 농도에 의해 결정된다.세포는 반드시 자신의 원생질체와 같이 침투하는 환경에서 생활해야 한다. 만약 생존환경의 침투압이 자신보다 높다면 배양된 세포는 탈수에 직면하여 사망할 가능성이 있다. 만약 생존환경의 침투압이 자신보다 낮다면 배양된 세포는 흡수의 만파에 직면하여 사망할 가능성이 있다. 그러나 대부분의 배양세포는 침투압에 대해 일정한 내성이 있다.사람의 혈장 삼투압은 290mOsm/kg으로 인체 세포를 배양하는 이상적인 삼투압으로 볼 수 있다.쥐세포의 삼투압은 320mOsm/kg 정도이다.대부분의 포유동물 세포를 배양하는 데는 배지의 삼투압을 260-320mOsm/kg 범위에서 조절하는 것이 좋다.

(4) 기상

체외 세포가 배양하는 기상 환경은 항상 5% CO2와 95% 공기로 구성된다.이 중 O2는 세포의 에너지 대사 과정에 관여한다.CO2는 배양액의 산성 알칼리도를 유지하는 데 쓰인다.

(5) pH

대부분의 세포 성장에 적합한 배양기 pH는 7.0-7.4 사이이며, pH7.4의 환경은 대부분의 포유동물 세포계에 적합하다.페놀레드는 배양기에서 배양액의 산성 알칼리도를 지속적으로 모니터링하기 위해 pH값의 표시제로 사용되며, 낮은 pH값에서는 페놀레드가 배양액을 노란색으로, 높은 pH값에서는 배양액을 보라색으로, pH값 7.2-7.4에서는 빨간색으로 만들어 세포배양에 적합하다.

(6) 무독성 무오염성

무독과 무균은 체외 배양 세포의 전제 조건이다.생체의 세포의 해독체계와 면역체계에서는 미생물이나 기타 유해물질의 침입에 저항할수 있지만 세포는 체외배양에서 유기체면역체계의 보호가 결핍하여 미생물에 대한 방어능력과 유해물질에 대한 해독능력을 상실한다.그러므로 세포의 생장환경의 무독무오염을 보장하는것은 세포배양의 성공의 가장 중요한 조건이다.세포배양과정에서 반드시 유독화학물질오염, 미생물오염, 부동한 세포간의 교차오염을 방지하는데 주의를 돌려야 한다.