이 연구는 홋카이도 건강과학대학 치구강생물학과의타케하루 니오카팀 발표:구두 생물학 Archives of Oral Biology정기간행물.연구는 쥐의 물린 근육에 초점을 맞추고 세 가지 문제를 중심으로 전개된다: (1) 혈관을 지배하는 부교감신경에 혈관활성장 펩타이드(VIP) 면역 반응성;（2) 정맥주사VIP혈관 확장을 유발할 수 있는지;（3) 아트로핀이 있거나 없는 경우 선택VIP수용체 옹색제[4Cl-D-Phe]⁶,Leu¹⁷]VIP부교감 신경혈관 확장에 미치는 영향.

요약

부교감 신경혈관 확장섬유는 콜린에너지와 비콜린에너지 두 가지 메커니즘을 통해 쥐가 근육을 물어뜯는 혈관을 지배하는 것으로 알려져 있지만 비콜린에너지 메커니즘은 아직 명확하지 않다.최근 몇 년 동안 혈관 활성 장 펩타이드 (VIP) 구강 턱 안면 (아래와 같은 턱하선과 하순) 의 부교감 신경혈관 확장 과정에 관여하는 것으로 밝혀졌지만, 쥐의 물린 근육에 대한 연구는 극히 제한적이다.이 연구는 쥐의 물린 근육을 연구 대상으로 삼아 다음과 같은 평가를 목적으로 한다.1혈관을 지배하는 부교감신경이VIP면역 반응성;（2) 정맥주사VIP혈관 확장을 유발할 수 있는지;（3) 아트로핀이 있거나 없는 경우 선택VIP수용체 옹색제[4Cl-D-Phe]⁶,Leu¹⁷]VIP부교감 신경혈관 확장에 미치는 영향.연구 결과, 부교감 귀 신경절(원신) 및 혈관 주위의 신경섬유 두 부위에서 모두 검출되었다VIP면역 반응성.정맥주사VIP혈관 확장을 유발하고[4Cl-D-Phe]⁶,Leu¹⁷]VIP약해진다VIP주사로 인한 혈관 확장 효과.단독 사용[4Cl-D-Phe]⁶,Leu¹⁷]VIP부교감 신경혈관의 이완을 억제할 수는 없지만[4Cl-D-Phe]⁶,Leu¹⁷]VIP아트로핀과 함께 사용하면 부교감 신경혈관의 이완을 약화시킬 수 있다.결과는 다음과 같습니다. (1) 교근혈관을 지배하는 절후부교감신경에는VIP；（2) 정맥주사VIP물근혈관의 확장을 유발할 수 있다;（3독버섯 알칼리 콜린 수용체가 아트로핀에 의해 차단되거나 아세틸 콜린 (ACh는) 방출이 억제되어 비활성화된 경우,VIP물린 근육의 부교감 신경혈관 확장 과정에 관여할 수 있다.

실험재료 및 기기

(1) 실험재료

1. 실험동물: 성인 수컷Wistar는다람쥐;

2. 추적제 및 시약:2%형광금, 무균 생리식염수,VIP, 선택VIP수용체 옹색제[4Cl-D-Phe]⁶,Leu¹⁷]VIP, 아토피, 우라탄, 판쿠브롬 암모늄;

3. 항체 및 염색 관련 시약:VIP항체, 낭포 아세틸콜린 운반체 항체,알렉사-488당나귀가 토끼를 막는다고 표시하다.IgG는항체,알렉사-568표식 당나귀 항염소IgG는항체, 형광소 표기 피마자 응집소I、1%비면역 당나귀 혈청,0.3%구불구불X-100은、0.3%소 혈청백단백,4%폴리포름알데히드,0.1M인산 완충액,30%사탕수수;

(2) 실험기기

4. Omegawave는FLO-C1 레이저 도플러 혈류계、형광 현미경、공초점 레이저 스캐닝 현미경、냉동절편기、해밀턴미량 주사기、가열 매트、인공호흡기、카테터 (대정맥 및 대동맥 삽관용)

Omegawave는FLO-C1레이저 도플러 혈류계

실험 과정

1. 동물 사육과 윤리 심사 비준

2. 형광 이중 표기 실험

3. 면역 조화 염색

4. 물근 혈액량 측정: 실험 전에 양쪽 목 미주 신경과 목 위 교감 줄기를 절단하여 미주 신경과 교감 신경의 영향을 배제한다.전기자극을 통해 좌측설신경중추 절단단을 통해 교근부교감신경반사성혈관확장을 유발하여Omegawave는FLO-C1 레이저 도플러 혈류계물근 혈액량 모니터링 및 기록(MBF는) 변경.정맥 주사 용량별로VIP, 관찰MBF는변화,주사100ng/kg VIP이전20분, 계속 입력[4Cl-D-Phe]⁶,Leu¹⁷]VIP, 그 쌍을 관찰하다VIP유발MBF는상승의 영향.그 밖에 각각 정맥에 아트로핀을 주사한 후 지속적으로 주입한다[4Cl-D-Phe]⁶,Leu¹⁷]VIP시, 그리고 둘을 함께 사용할 때 전기는 설신경을 자극하여 기록한다MBF는변화, 결과는 약 사용 전 대조 반응의 백분율로 표시됩니다.

Omegawave는FLO-C1레이저 도플러 혈류계

（A) 혀 신경 (LN은) 전기 자극(대조) 및 혈관 활성장 펩타이드 정맥주사(VIP, 복용량은 각각1、10 화100 ng/kg의) 평균 혈류량 유발 (MBF는) 증가의 일반적인 예입니다.

(B)주사를 종합했다 0(생리식염수만),1、10 화100 ng/kg VIP후유발적MBF는증가 상황 (n = 4）。데이터LN은전기 자극이 유발하는 대조 반응의 백분율 표시.

(C)（C) 선택VIP수용체 옹색제([4 -염소- D -페닐알라닌 ⁶,라이트 아미노산¹ ⁷]혈관 활성장 펩타이드,[4Cl-D-Phe]⁶, 레우¹⁷[VIP]) 존재 및 결핍 시, 주사100 ng/kg VIP유발MBF는증가의 일반적인 예입니다.

(D)（D）[4Cl-D-Phe]⁶, 레우¹⁷[VIP]대100 ng/kg VIP주사소 유발MBF는증가된 영향은 사전 처리 반응의 백분율로 표시됩니다.n = 5）。

5. 통계 분석

실험 결론

1. 쥐가 근육을 물어뜯는 혈관을 지배하는 절후 부교감 신경에는VIP면역 반응성, 그리고VIP와VAChT는(콜린 표지물) 귀 신경절에 있는FG는표기 뉴런 및 교근 혈관 주위의 신경섬유에는 공동 위치가 존재한다;

2. 정맥주사VIP약물 의존성 방식으로 쥐의 근육 혈관 확장을 유발하고 전신 동맥 혈압에 영향을 주지 않으며 선택성VIP수용체 옹색제[4Cl-D-Phe]⁶,Leu¹⁷]VIP억제 가능VIP유발되는 이런 혈관 확장 효과는VIP물근혈관벽을 활성화시켜서VIP수체가 역할을 발휘한다;

3. 단독 사용[4Cl-D-Phe]⁶,Leu¹⁷]VIP설신경 자극이 유발하는 교근 부교감 신경혈관 확장에는 영향을 주지 않으며, 아트로핀을 단독으로 사용하면 이 혈관 확장 효과를 부분적으로 약화시킬 수 있다;당연히[4Cl-D-Phe]⁶,Leu¹⁷]VIP아트로핀과 함께 사용할 때 이 혈관의 확장효과를 억제할수 있으며 독버섯알칼리수용체가 아트로핀에 의해 차단되거나 아세틸콜린의 방출이 억제될 때VIP물린 근육의 부교감 신경혈관 확장 조절에 관여한다.