이 연구는토시야 사토팀 구성,그리고에 게시미국 생리학 저널 - 규제, 통합 및 비교 생리학정기간행물에.

研究以우라탄 마취큰 쥐（즉 아미노산 에스테르）실험 대상입니다, 네그설신경 (LN은) 중추 절단단은 전기 자극을 가하고 턱하선의 혈류량을 측정한다 (SMGBF는) 및 설하선 혈류량(SLGBF는), 부교감 신경혈관 확장 통제에서 쥐의 턱하선과 설하선의 차이를 탐구하기 위한 것이다.

요약

본 연구는 레이저 산반 영상 혈류계를 사용하여우라탄 마취의 쥐 중 혀 신경 중추 절단단에 전기 자극을 가해 쥐의 턱하선 혈류량(SMGBF는) 및 설하선 혈류량(SLGBF는)의 변화그 결과 설신경 자극은 턱하선 혈류량과 설하선 혈류량을 강도 의존성과 빈도 의존성 증가를 일으킬 수 있으며 턱하선 혈류량 증가폭이 설하선 혈류량보다 큰 것으로 나타났다.정맥주사 자율신경콜린 신경절 저해제인 육갑암모늄(hexamethonium), 두 가지 선체의 혈액량 증가를 현저하게 억제할 수 있다.항독성 버섯 알칼리제 아트로핀(atropine는) 턱하선의 혈류량 증가를 현저하게 억제할 수 있고, 설하선의 혈류량 증가는 일부 억제 작용만 한다.아트로핀을 사용한 경우 혈관 활성장 펩타이드(VIP) 수용체 옹색제는 아트로핀이 차단하지 못한 부분의 설하선 혈류량 증가를 현저하게 억제할 수 있지만, 혈관 활성장 펩타이드 수용체 옹색제를 단독으로 사용하면 이런 효과가 없다.설신경 자극 후 선체의 혈류량이 기초 수준으로 회복되는 데 걸리는 시간은 혈관 활성장 펩타이드를 투여한 후보다 더 짧다.그러나 아트로핀을 주사하면 설신경 자극으로 인한 선체 혈류량 회복 시간이 용량 의존성이 현저하게 길어져 결국 혈관 활성장 펩타이드를 주사한 후의 회복 시간과 같은 수준에 도달한다.

이 연구 결과는 다음과 같습니다.1) 설신경 자극은 부교감신경이 매개하는 턱하선의 혈류량 증가(주로 콜린섬유로 유발)와 부교감신경이 매개하는 설하선의 혈류량 증가(콜린섬유와 비콜린섬유가 공동으로 유발);2) 혈관 활성 장 펩타이드 에너지 메커니즘은 비콜린 에너지 섬유가 매개하는 설하선의 혈류량 증가에 참여하며 독버섯 알칼리 에너지 메커니즘이 활성화되지 않을 때 활성화된다.

실험재료 및 기기

(1) 실험재료

실험동물：11-16주령, 체중325-490g의 수컷Wistar는다람쥐.

(2)실험계기

1. 혈관 삽관 관련 기구: 대퇴정맥과 대퇴동맥 삽관에 사용되는 기구.

2. 인공 통기 설비: 호흡기, 기관 삽관, 적외선 분석기.

3. 혈류 모니터링 기기：Omegawave는 OZ-1은레이저 산반 혈류 영상기（턱하선과 설하선의 혈류량을 모니터링하여 고해상도 2차원 혈류 이미지를 획득하는 데 사용).

4. 신경 자극 기구: 양극 은 전극, 전기 자극기 (설신경 중추 절단단에 전기 자극), 양안 현미경 (설신경 분리).

5. 생리 파라미터 모니터링 기기: 전신 동맥 혈압 모니터링 (SABP는) 및 심박수 (HR)의 디바이스입니다.

실험 과정

(1) 동물준비

(2) 레이저 산반 혈류 영상

마취된 쥐를 수평 위치에 놓고 악하선과 설하선을 검은색 폴리우레탄 패드에 놓고사용Omegawave는 OZ-1은레이저 산반 혈류 영상기의780nm반도체 레이저는 그것을 분산 조명한다.산란광선을 필터링한 후 목 위에 있는 전하 결합 장치(CCD는) 카메라 테스트.이동 적혈구의 수와 속도와 관련된 원시 산반 이미지를 기록하고 분석하기 위해 컴퓨터로 전송합니다.

Omegawave는 OZ-1은레이저 산반 혈류 영상기

전기는 왼쪽 혀 신경을 자극합니다 (LN은) 중추절단단쌍측하악하선(SMG는) 및 설하선(SLG는혈류의 영향

A: 사진은 양쪽 하악선 (SMG는) 및 설하선(SLG는) 검은색 우라탄 패드와 자극 전(정지 상태), 설신경(LN은) 자극이 시작되면12 초 및20 초의 일반적인 반점 이미지 시간 순서입니다.

B: 양쪽 하악선 (SMG는) 및 설하선(SLG는)의 혈류 (au, 모든 단위), 혈관 전도성 (VC는) 및 전신동맥혈압 (SABP는) 변화의 일반적인 예입니다.

C: 양쪽 설하선(SLG는, 실심주) 및 하악하선(SMG는, 공심주) 혈관 전도성 (VC는) 변화의 평균 (±SE, 표준 오류) (n=8, 샘플 양은8）。방차 분석 을 채택 하여 진행 하다투키검사, 혈관 전도성 평가(VC는) 변화 간의 차이에 대한 통계학적 유의성.* P <0.01>(차이는 매우 현저한 통계학적 의의를 가지고 있다.)

(3) 혀 신경전기 자극

두 눈 현미경 아래에서 왼쪽 혀 신경을 분리합니다 (LN은), 절단 후, 전기 자극기에 연결된 양극 은 전극으로 그 중추 절단단에 전기 자극을 가한다.쥐마다 전압, 주파수,2ms펄스 지속 시간 은 혀 신경 에 대해 한쪽 자극 을 주고 매번 자극 이 지속된다20 초, 자극 간격15분.

(4) 약물작용검측

1. 모든 약물은 무균 생리식염수로 용해되어 대퇴정맥을 통해 약을 준다.

2. 혀 신경전기 자극으로 인한 턱하선 혈류량을 측정하기 위해(SMGBF는) 및 설하선 혈류량(SLGBF는) 자주신경계 및 독버섯알칼리수용체, 혈관활성장펩티드수용체에 의해 유도되는지 여부를 증가하여 각각 다음과 같은 조작을 진행한다.

◦정맥주사10mg/kg의육갑 암모늄 브롬화물은 적어도 약을 주고 있다5 분 (보류 중SMGBF는、SLGBF는화SABP는안정 상태) 에 도달하면 혀신경 자극으로 인한 혈류 변화를 측정해 같은 부피의 생리식염수를 대조한다.

◦주사펌프로2ml/시간의 유속 정맥 주입0.1mg/ml의황산 아트로핀과0.2mg/ml의혈관 활성장 펩타이드 수체 옹색제, 주입 시작 최소10 분 후 혀신경 자극으로 인한 혈류 변화를 측정한다.

(5) 설하선 혈액량 증가의 시간 과정 분석

왼쪽 혀 신경중추 절단단용20V、20Hz의、2ms펄스 지속 전기 자극20 초 또는 정맥주사100ng/kg의브롬화 아세틸콜린(ACh는）、10ng/kg의혈관 활성장 펩타이드(VIP), 설하선 혈류량 유발 (SLGBF는)이 증가합니다.정맥주사 용량별 (1-100μg/kg)의 황산 아토피 (부피0.1ml), 같은 부피의 생리식염수를 대조。

실험 결론

1. 설신경 (LN은) 자극은 턱하선의 혈류량(SMGBF는) 및 설하선 혈류량(SLGBF는) 강도 의존성과 빈도 의존성이 증가하고 턱하선 혈류량 증가폭이 설하선 혈류량보다 크며 전신동맥 혈압(SABP는) 현저하게 상승, 심박수 (HR) 현저한 변화가 없고 동측선체의 혈류량 증가가 대측보다 현저하게 크다는 것은 이런 혈류량 증가가 혈압 변화의 수동적인 원인이 아니라“혈관이 펴지다”작용의 결과.

2. 정맥주사 자주신경콜린은 신경절정체제인 육갑암모늄을 주사하여 턱하선과 설하선의 혈류량의 증가를 뚜렷이 억제할수 있는데 이는 설신경자극으로 인한 두가지 선체의 혈류량의 증가가 주로 부교감신경에 의해 전도된다는것을 말해준다.

3. 항독버섯알칼리약물인 아트로핀은 턱하선의 혈류량 증가를 현저하게 억제하고 설하선의 혈류량 증가를 부분적으로 억제하며 혈관활성장펩타이드(VIP) 수용체 옹색제는 두 선체의 혈류량 증가에 영향을 미치지 않지만, 아트로핀을 사용하는 경우 혈관 활성 장 펩타이드 수용체 옹색제는 아트로핀이 차단하지 못한 부분의 설하선 혈류량 증가를 현저하게 억제할 수 있다. 이는 턱하선 혈류량 증가는 주로 콜린 섬유에 의해 유발되며, 설하선 혈류량 증가는 콜린 섬유와 비콜린 섬유가 함께 유발되며, 설선 활성 펩타이드의 비콜린 섬유가 함께 유발되고 설선 활성 메커니즘이 증가한다.

4. 설신경 자극 후 선체 혈류량이 기초 수준으로 회복되는 시간은 혈관 활성장 펩타이드를 주사한 후보다 더 짧다. 아트로핀을 주사한 후 설신경 자극으로 인한 선체 혈류량 회복 시간은 약물 의존성이 현저하게 길어진다. 최종적으로 혈관 활성장 펩타이드를 주사한 후의 회복 시간과 일치한다. 이는 독버섯 알칼리 메커니즘이 활성화될 때 혈관 활성장 펩타이드 메커니즘이 활성화되고 설하선 혈류 활성장 펩타이드에 의존도가 증가한다는 것을 설명한다.

5. 이 연구결과는 쥐의 턱하선 부교감 신경혈관 확장에 대한 기존 보도와 일치(턱하선 부교감 신경이 매개하는 혈류량 증가는 주로 콜린 섬유로 인한 것), 설하선에 콜린 에너지와 비콜린 섬유가 공동으로 매개하는 혈류량 증가를 발견하였으며, 쥐의 타액선 부교감 신경혈관 운동신경에 콜린 자체 수용체가 존재할 수 있으며 설하선에서 혈을 억제할 수 있는 것으로 추정되며 이는 구강부동력학적으로 구강 조절할 수 있다.