토시야 사토팀에 게시Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol은정기간행물의 이 문장연구 내용은 다음과 같습니다.통과우라탄마취（아미노산 에스테르）그리고 교감신경이 절제된 2 형 당뇨병 쥐와 비당뇨병 쥐 연구2 형 당뇨병과 관련된 이하선 부교감 신경혈관 확장기능 손상과 타액 분비 감소 사이의 연관성을 분석하고, 3대 주요 타액선(이하선, 턱하선, 설하선)의 혈류 역학과 타액 분비의 관계 및 잠재적 메커니즘을 분석한다.

요약

레이저 산반 영상과 타액을 수집하는 방법으로우라탄마취 및 교감신경절제의 2 형 당뇨병 쥐와 비당뇨병 쥐 중 3대 주요 타액선의 혈류 역학과 타액 분비 사이의 관계를 연구했다.당뇨병 쥐와 비당뇨병 쥐 중 설신경 자극은 모두 선체의 혈류량을 빠르게 증가시키고 3대 선체의 타액 분비를 유도한다.비당뇨병 쥐에 비해 당뇨병 쥐의 이하선의 혈류량 증가폭과 타액 분비량뚜렷하다감소그러나 턱하선, 설하선 등 다른 선체에서는 이런 현상이 관찰되지 않았다.아세틸콜린을 정맥주사하면 복용량 의존성 방식으로 이하선의 혈류량을 증가시킬 수 있지만 당뇨병 쥐의 이런 반응은 비당뇨병 쥐보다 낮다.마찬가지로 당뇨병 쥐 이하선에서도M1화M3의독버섯 알칼리 아세틸콜린 수체(mAChR는)의mRNA를표현 수준도 비당뇨병 쥐보다 상대적으로 낮았다.우리의 연구 결과는2 형 당뇨병은 이하선의 부교감 신경 혈관 확장 기능과 타액 분비 기능을 손상시킬 수 있으며, 콜린 혈관 확장 통로의 문란이 부교감 신경이 매개하는 선체 혈관 확장 기능을 손상시킬 수 있는 잠재적 메커니즘 중 하나일 수 있음을 제시한다.

실험재료 및 기기

(1) 실험재료

실험동물

◦2 형 당뇨병 모델 쥐:8-10주령(당뇨병 전단계)과45-50주령(만성 당뇨병기)의 수컷OLETF는쥐, 이 쥐는 담낭수축소(CCK는）-1 수용체 결핍은 다식을 초래하고, 다은성 유전자와 테스토스테론 조절에 의해 유발된다2 형 당뇨병;

◦비당뇨병 대조 쥐: 동갑내기 수컷레토다람쥐;

실험 약물

◦마취 관련: 이소플라본,우라탄

◦근육 이완제: 반쿠브롬 암모늄;

◦신경전달물질 및 용제: 아세틸콜린, 무균 생리식염수;

◦분자 생물학 시약:TRIzol/mRNA는시약,FastStart Essential DNA 그린 마스터, 대상M1-M5 mAChR는화β -근동단백질(β-액틴)의 특이성 유인물입니다.

(2) 실험기기

1. 혈류 측정 기구

Omegawave는 OZ-2는레이저 산반 혈류 영상기:채택780nm반도체 레이저 가 선체 를 분산 조사하여 2차원 혈류도 를 얻다그리고패키지를 통해팔레트소프트웨어 분석 관심 영역의혈류 신호;

Omegawave는 FLO-C1레이저 도플러 혈류계:하순의 왼쪽 혈류 변화를 모니터링하는 데 사용되며, 모든 기록은 제로 혈류 전기 교정을 진행하며, 혈류 변화는 임의의 단위로 (a.u.) 표현입니다.

Omegawave는 FLO-C1레이저 도플러 혈류계

Omegawave는 OZ-2는레이저 산반 혈류 영상기

쥐 전기 자극 부위, 혈류 측정 부위 및 타액 수집 방법 안내도

A: 자극 부위는 설신경(LN은)의 중추 절단단.

B,C: 혈류 측정 부위:B그림은 레이저 반점 영상 기술로 이하선을 측정한다(PG는), 하악하선(SMG는) 및 설하선(SLG는)의 혈류;C레이저 도플러 혈류계 (LDF는) 아랫입술의 혈류를 측정한다.

D: 타액 분비 기록 방법: 폴리에틸렌 도관을 통해 와튼관을 통해 타액을 수집한다.입안에 솜덩이를 넣어 침을 모으기;습도 측정 장치로 점막의 습도를 측정하다.

생리 파라미터 모니터링 기기

소전극형 혈당분석기、호흡기、적외선 분석기、전자 자극기.

타액과 점막 습도 측정 기기

습도 측정기、폴리에틸렌 튜브, 예비 무게 면 볼, 정밀 천평.

실험 과정

1. 동물 준비 및 마취 관리

2. 체중 및 혈당 측정

실험 전 쥐 금식 15 시간, 이소불화탄소 마취 후 체중을 측정한다;미정맥 채혈약20μL, 사용Antsense Duo는혈당 분석기 는 공복 혈당 을 측정하고, 각 샘플 은 측정한다2 이차 평균값.

3. 선체 혈류와 혈관 전도율 검사

다람쥐는 수평으로 누워,Omegawave는 FLO-C1레이저 도플러 혈류계레이저는 3대 타액선을 비추고,Omegawave는 OZ-2는레이저 산반 혈류 영상기산란광을 채집하여 원시 산반 이미지 생성(적혈구 수량 반영/속도);LDF는아랫입술 왼쪽 혈류 모니터링.

당뇨병 쥐 (실심원, 그룹당 샘플량 n=6) 및 비당뇨병 쥐 (공심원, 그룹당 샘플량n=6)의 당뇨병 전단계 및 당뇨병 만성기, 채택Omegawave는 OZ-2는레이저 산반 혈류 영상기선체 및 아랫입술의 정식 혈류를 측정하다 [모든 단위 (a.u.）]

4. 설신경 자극과 아세틸콜린 주입

5. 타액 분비와 구강 점막 습도 측정

6. 실시간RT-PCR는검사mAChR mRNA는표현

7. 통계 분석

실험 결론

2 형 당뇨병은 주로 이하선의 부교감 신경혈관 확장 기능과 타액 분비 기능을 손상시키지만 턱하선, 설하선에 미치는 영향은 적다.콜린은 혈관을 확장하고 통로가 문란하게 한다 (특히M1、M3 mAChR는발현 저하) 는 이하선 부교감 신경이 매개하는 혈류 증가가 손상되는 잠재적 메커니즘으로, 선체 혈류 역학적 이상은 당뇨병 관련 구간증(xerostomia는)의 발생.